La microinyección es un
proceso que consiste en utilizar microagujas para insertar sustancias a un
nivel microscópico o en el límite de lo macroscópico dentro de una célula viva.
Es un simple proceso mecánico en el cual una aguja extremadamente fina penetra
la membrana celular y a veces la membrana nuclear para lanzar su contenido. La
microinyección es normalmente realizada bajo un microscopio óptico llamado
micromanipulador. El proceso es frecuentemente usado como un vector en
ingeniería genética y transgenética para insertar material genético en una
célula. El proceso de clonación también involucra microinyecciones.
Las microagujas miden
alrededor de 10 micrómetros. Pueden contener cerca de 15 microlitros de ADN. Es
similar a la sección transversal de un cabello humano. Es un método muy preciso
de transferencia génica. Requiere personal capacitado.
En biología molecular, el proceso de
electroporación es usado habitualmente para la transformación de bacterias,
levaduras y protoplastos vegetales. Además de membranas lipídicas, las
bacterias también tienen una pared celular compuestas de peptidoglicano y sus
derivados.
La electroporación
La electroporación o
electropermeabilización es un significativo aumento de la conductividad
eléctrica y la permeabilidad de la membrana plasmática celular causado por un
campo eléctrico aplicado externamente. Es habitual en biología molecular como
forma de introducción de diferentes sustancias en células, como por ejemplo
sondas moleculares, un fármaco que puede cambiar las funciones celulares o un
fragmento de DNA codificante, como puede ser un plásmido.
Cuando el voltaje que
atraviesa una membrana plasmática excede su rigidez dieléctrica se forman
poros. Si la fuerza del campo eléctrico aplicado o la duración de la exposición
al mismo se eligen apropiadamente, los poros formados por el pulso eléctrico se
sellan tras un corto período, durante el cual los compuestos extracelulares
tienen la oportunidad de entrar a la célula. Sin embargo, una exposición
excesiva de células vivas a campos eléctricos puede causar apoptosis o
necrosis, procesos que provocan la muerte celular.
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