Basados en la formación de
complejos que las células sean capaces de adquirir e incorporar, bien sea
directamente mediante la ruta endocítica (fosfato cálcico, DEAE dextrano) o a
las membranas (lipofección).
MÉTODO DEL FOSFATO CÁLCICO.
Se empezó a usar esta
técnica en los años 60, pero fue en los 70 cuando se empezó a desarrollar
suficientemente para tener buenas eficacias de transfección. Se basa en la
precipitación del DNA exógeno y los iones de calcio, provocando que la célula,
mediante endocitosis, introduzca el DNA en su interior. La eficacia de
transfección puede llegar al 10% de las células, aunque suele ser transitoria.
No es una técnica que
provoque toxicidad en las células pero la expresión del transgen es muy
pequeña. Únicamente se usa en cultivos celulares, y por lo tanto su aplicación
es "ex vivo".
MÉTODO DEL DEAE DEXTRANO.
Basado en la obtención de
complejos entre la resina DEAE y el DNA. Los polímeros de DEAE dextrano o
polybreno tienen una carga que les permite unirse a las muy negativamente
cargadas moléculas de DNA. El DNA acomplejado se introduce en las células
mediante choque osmótico mediante DMSO o glicerol. El uso de DEAE dextrano se limita a las transfecciones
transientes.
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